وبلاگ

توسعه محصولات دارویی جدید فرآیندی پیچیده و پرهزینه است که نیازمند نوآوری و کارایی است. ایمونواسی با توان عملیاتی بالا (HTIs) یک فناوری نوظهور است که هدف آن تسریع فرآیند کشف دارو و بهبود کارایی غربالگری ترکیبات کاندید است. در این مقاله، ما نقش HTI را در تغییر توسعه دارو بررسی می‌کنیم و کاربرد موفق HTI با Lumit را پیشنهاد می‌کنیم.^® فن آوری.

ایمونواسی سنتی در مقابل پرتوان

ایمونواسی از ویژگی اتصال آنتی بادی ها برای شناسایی و تعیین کمیت مولکول های خاص – مانند پروتئین ها، پپتیدها یا هورمون ها – در یک نمونه بیولوژیکی استفاده می کند. این سنجش ها ابزارهای حیاتی در تشخیص بالینی و کشف دارو هستند. سنجش‌های ایمنی سنتی شامل روش‌های دستی پر زحمت – مانند شستشوی نمونه‌ها و انجام چند مرحله رقیق‌سازی – می‌شود که آنها را برای کشف داروی با کارایی بالا غیرعملی می‌سازد.

HTI ها با ارائه سرعت، دقت و مقیاس پذیری در روش های کشف دارو، چشم انداز را تغییر می دهند. آنها سیستم‌های رباتیک خودکاری هستند که برای انجام واکنش‌های متعدد به سرعت و کارآمد با استفاده از اجزای کلیدی مانند سیستم‌های جابجایی مایعات، میکروپلیت‌ها و ابزار تشخیص طراحی شده‌اند. به طور کلی، HTI ها غربالگری ترکیب را تسریع می کنند، منابع و مقرون به صرفه هستند، خطای انسانی را به حداقل می رسانند و مدیریت داده ها را ساده می کنند. در زیر مزایای کلیدی برای اجرای HTI در جریان کار کشف دارو را بیان می کنیم:

1. غربالگری تسریع شده: هزاران ترکیب را می توان در چند ساعت غربال کرد و زمان مورد نیاز برای شناسایی نامزدهای دارویی بالقوه را به طور چشمگیری کاهش می دهد.
2. شناسایی هدف: محققان می توانند به طور همزمان میل اتصال ترکیبات متعدد به یک هدف خاص را ارزیابی کنند.
3. منحنی‌های دوز-پاسخ: HTIs منحنی‌های دوز-پاسخ را برای چندین ترکیب در یک آزمایش واحد ایجاد می‌کنند و بینشی را در مورد قدرت و قدرت ترکیب ارائه می‌کنند.
4. هزینه کم، ضایعات کم: با استفاده از میکروپلیت ها با چندین چاه کوچک، HTI ها با غربالگری بسیاری از ترکیبات با منابع کمتر، حفاظت از معرف را امکان پذیر می کنند و هزینه های کلی را کاهش می دهند.
5. کاهش خطای انسانی: اتوماسیون خطر خطای انسانی در فرآیند تأیید را کاهش می دهد.
6. مدیریت داده ها: حجم وسیعی از داده های تولید شده توسط HTI با استفاده از نرم افزارهای پیشرفته مدیریت می شود، تجزیه و تحلیل و تفسیر داده ها را ساده می کند و به محققان اجازه می دهد تا به سرعت تصمیمات آگاهانه بگیرند.

تعیین سریع و حساس آزادسازی سیتوکین از سلول ها

لازار و دیگران. یک روش سنجش سریع و همگن برای اندازه‌گیری آزادسازی سیتوکین از سلول‌های زنده با استفاده از Lumit ایجاد کرد^® رویکرد ایمونواسی با کارایی بالا در این تکنیک، آنتی بادی های اولیه منفرد به یک سیتوکین خاص به صورت جداگانه یا با زیرواحد کوچک 11 اسید آمینه NanoBiT نشاندار می شوند.^® لوسیفراز (SmBiT) یا زیرواحد مکمل 17.6 کیلو دالتون آن (LgBiT). هنگامی که این آنتی بادی های نشاندار شده به سیتوکین هدف نزدیک می شوند، زیرواحدهای SmBiT و LgBiT یک لوسیفراز درخشان را بازسازی می کنند که در صورت وجود سوبسترا، فوریمازین، بیولومینسانس متناسب با سطح آنالیت تولید می کند. در این مطالعه، ایمونواسی برای چندین سایتوکین انسانی، از جمله IL-1b، IL-2، IL-6، IFN-g، و TNF-a توسعه داده شد که مقیاس پذیری و اثربخشی HTI را نشان می دهد.

HTI های توسعه یافته در این مطالعه هم حساس و هم موثر بودند. آنها دریافتند که این سنجش‌ها دارای حساسیت‌های بسیار خوبی هستند (LLODs < 10 pg/ml) и широки линейни диапазони (>3 log غلظت سیتوکین)، که نیاز به رقیق سازی نمونه را از بین می برد. علاوه بر این، افزودن مستقیم معرف‌های سنجش به صفحات 96 چاهی حاوی PBMC‌های انسانی تحت درمان با محرک‌های مختلف، انتشار گسترده، وابسته به زمان و دوز TNF-α و IL-6 را نشان داد. تجویز مستقیم مشابه به سلول‌های T فعال مخلوط شده با سلول‌های راجی B هدف، آزادسازی مشخصی از IL-2 و IFN-g را در پاسخ به فعال‌کننده سلول T دو اختصاصی Blincyto نشان داد.^® (EC50 ~ 0.2 نانوگرم در میلی لیتر). ارزیابی بیشتر لومیت را نشان داد^® سنجش‌های ایمنی سیتوکین تا قالب 384 چاهی مقیاس‌پذیر هستند و عملکرد آماری عالی ارائه می‌دهند (CV پاسخ < 10%, Z' стойности > 0.68). در مورد کار آنها بیشتر بخوانید اینجا.

نتیجه

توسعه داروسازی های جدید را می توان با سنجش های ایمنی با کارایی بالا که سرعت، دقت و مقیاس پذیری را ارائه می دهند، متحول کرد. سنجش‌های ایمونولوژیک سنتی، اگرچه ارزشمند هستند، اما می‌توانند برای کشف داروی با کارایی بالا، پرزحمت و غیرعملی باشند. در مقابل، HTI ها غربالگری ترکیبات را تسریع می کنند، شناسایی هدف را بهبود می بخشند، خطای انسانی را به حداقل می رسانند، مدیریت داده ها را ساده می کنند و موارد دیگر. ما یک مثال را برجسته می کنیم که تعیین سریع و حساس آزادسازی سیتوکین را با استفاده از سلول های زنده نشان می دهد ایمونواسی Lumit®. این مزایا HTI را به ابزاری ارزشمند در چشم انداز تحقیقات دارویی تبدیل می کند.